徐彤：西农张德礼教授病毒学各论第二讲情况、课外、课内思考题
徐彤:西农张德礼教授病毒学各论第二讲情况、课外、课内思考题解答
一、第二讲内容、方式方法、心得体会及意见建议
二、课外思考题解答：共五题
三、30－31章书后思考题解答
微生物课后作业
一、课时内容
1.内容：具有反转录过程的病毒双股RNA病毒课外知识
2.方式方法：（1）以课本知识为基础，结合课件对课程内容进行详细讲解，力求使学生理解并掌握课程内容；
（2）同时，老师讲课之余对相关内容进行联系拓展，大量延伸并补充课外知识，扩大学生的知识层面。
3.心得体会：经过第二讲的学习，更加了解病毒的相关知识，对课本知识有进一层的理解，以及，经过老师的点播，明白了课程内容与课外知识的联系，对后续的学习有所帮助。同时，也更加体会到了老师认真负责、倾囊相授的教学态度。
4.意见建议：建议老师可布置贴近专业课本的思考题，以消化理解课本知识为主要目的，以拓展课外知识为辅。
二、课外思考题
1.病毒感染的信息传递超级高速公路?
病毒感染的超级高速公路是指机体在接受病毒感染攻击信号刺激，超高速传入免疫系统，到机体免疫系统瞬时灵敏响应发出应对战斗信号，先后调动机体非特异性天然免疫和特异性免疫因素应对，与病毒殊死战斗过程的信息传递通路情况。
2.我倡导安全健康快乐学习研究的核心关键是兴趣爱好，为什么?当代压力或战略需求作为动力，不能转化为兴趣爱好，长期学习工作行吗？
（1）兴趣可以大大提高学习的积极性和主动性，从而提高学习效率。兴趣对学习起着推动的作用，有兴趣才有心思去做自己感兴趣的事情，才会下工夫，才会动脑子思考，从而具有独立思考的能力。兴趣可以激发孩潜力，如果对某一方面或者某一事物感兴趣，兴趣会促使人主动学习研究，并且有毅力坚持完成这项任务。兴趣在学习中发挥着非常关键的作用，并且间接着影响性格和其他方面的培养，并同时不断提高和完善自己。
（2）从心理学角度看，压力是心理压力源和心理压力反应共同构成的一种认知和行为体验过程。通俗地讲，压力就是一个人觉得自己无法应对环境要求时产生的负性感受和消极信念。在少数情况下，压力会产生正向积极作用；但更多情况下，压力对一个人产生的是负面影响，造成精神焦虑、心神不宁、情绪低沉等现象，故不能长期存在，将其作为工作动力更是不可取。
3.科研严谨、动物弱毒疫苗临床试验实施、重大突发新现传染病疫情病原公告、新型病毒流出病学三环节及流行特点、消毒措施面向大众科普等言行尺度把握原则要求及重要性?可举例说明。
（略难）
4.艾滋病毒或乙型肝炎病毒的抗病毒治疗方法进展效果明显，却依旧不能或很难靠药物清除病毒，为什么?
原因：（部分）
a、任问药物都不能进入肝细胞核
目前世界上所用的各种治疗药物,只能被吸收进入血液,或进入到肝细胞浆中,而不能透过核膜进入肝细胞核,因此,对进入肝细胞核的HBV没有作用,这就保近了细核基因不受干抗和破坏。
b、HBV-DNA与肝细胞核的核蛋白发生整合
这是乙肝病毒不能消除的重要原因。发生整合后的肝细胞核蛋白DNA属于异常DNA,不可能HBV-DNA从整合的DNA中进行清除,除非把肝细胞破坏。发生DNA整合后的肝细胞即为异常干细胞。这种异常细胞是发生肝硬化和形成肝座的细胞基础。
c、发生整合后的HBV-DNA,仍具有HBV的生物活性,仍可継续复制,形成新的HBV,并可再次进入别的肝细胞,又发生新的整合,因此整合的肝细胞逐渐增多
d.发生DNA整合的肝细胞,可发生分裂和再生,使这种异常绌吧数悉多,由单个细胞逐渐形成异常肝细胞团。
5.简述逆转录RNA病毒或鸡传染性腔上囊病病毒的复制增殖过程?什么是病原体相关分子模式(PAMP)?
（1）逆转录病毒：非缺损的逆转录病毒基因组有3个主要成分:gag、pol和env。gag基因编码3-6种非糖基化的病毒结构蛋白,包括基质蛋白MA、衣売蛋白CA及核衣売蛋白NC,pol基因编码反转录酶(RT)及整合酶(IN),em基因编码两种囊膜蛋白:受体结合蛋白(SU)及嵌膜蛋白(TM)。基因组的末端的某些结构如长末端重复子(LTR),作为启动子与转录活性有关。
急性转化性的逆转录病毒具有第4个基因,即肿瘤基因(zomc),但通常其他基因例如env基因缺失。因此大多含v-onc基因的病毒不能合成完整的囊膜,是复制缺陷型,它们总是与非缺陷的病毒同时存在,后者作为辅助病毒协助其完成复制。Rous肉瘤病毒是个例外,其基因组含病毒肿瘤基因v-src,同时含有gag、pol以及env基因,因此自身即能完成复制。
（2）病原相关分子模式是模式识别受体（PRR）识别结合的配体受体，主要是指病原微生物表面某些共有的高度保守的分子结构，如G-菌的脂多糖，G+菌的寡肽糖和真菌的酵母多糖等；也包括宿主凋亡细胞表面某些共有的分子结构，如磷酯酰丝氨酸等。PAMP数量有限，但在病原微生物中分布广泛。
三、课本思考题
第三十章
1.阐述逆转录病毒及反转录酶的结构特点。
（1）逆转录病毒：颗粒直径80-100纳米，有囊膜，具有独特的三层结构，最内层为基因组核衣壳蛋白复合物，包含反转录酶，螺旋对称中层为20面体衣壳，直径约60纳米，外层为源于宿主细胞膜的囊膜。基因组为二倍体，有两个线状的正链单股RNA组成。
（2）反转录酶是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
2.逆转录病毒科如何分类?
（1）正逆转录酶亚科：甲型逆转录病毒属、乙型逆转录病毒属、丙型逆转录病毒属、丁型逆转录病毒属、戊型逆转录病毒属、慢病毒属
（2）泡沫逆转录病毒亚科：泡沫病毒属
3.试述禽白血病病毒的亚型及致病性。
禽白血病病毒又可分为A-J共10个亚群。其中A-D亚群为外源性,宿主为鸡。在蛋鸡群中A亚群最为普遍,其次为B亚群,C、D亚群致病力低。E亚群为内源性,宿主为鸡。F、G亚群的宿主为雉,H亚群为斑鸠、1亚群为鹌鹑。J亚群在1971年发现,外源性,宿主为鸡,引致髓细胞瘤,对肉用鸡危害严重。
病毒所致的白血病在鸡出売后数月即可传遍鸡群。如不存在急性转化性的毒株,则在14周龄以上的鸡散发,发病率3%~20%。雏鸡先天性感染外源性非缺陷型白血病病毒时,可发生肿瘤,并产生病毒血症。整合到鸡的不同体细胞基因组内的前病毒在某种情况下c-onc基因被激活,从而产生肿瘤。由于淋巴细胞在初生数周内有活跃的细胞分裂,具有病毒受体的淋巴细胞就比其他细胞更易感,更易传递病毒。
4.比较猫白血病病毒与猫免疫缺陷病毒的致病特点。
猫白血病病毒表现为淋巴瘤、成红细胞性或成髓细胞性白血病。
猫免疫缺陷病毒（FIV）致病过程有三阶段:以淋巴结病及发热为特征的急性阶段,漫长的亚临床阶段,以退行性病变和机会感染为特征的终末阶段。此病毒主要以细胞损害和细胞发育障碍为主，表现为胸腺萎缩、淋巴细胞减少、嗜中性白细胞减少、骨髓红细胞系发育障碍而引起的贫血。后一类免疫反应低下，易继发感染。
5.牛白血病病毒如何传播?用什么方法检测?
牛白血病病毒并无很高的传染性，病毒水平传播不易波及相邻牛群，除非密切或长时期接触。损伤、直肠检查的手套、注射用针头及外科器械等可传播病毒，昆虫媒介的机械传递作用很小。病毒可经胎盘感染胎儿，一般新生犊牛的感染率小于10%。已证实通过正常接触病毒不能由牛传给绵羊，反之亦然。也没有病毒由牛传给人的证据。
诊断：国际贸易指定的方法是用琼脂凝胶免疫扩散试验或ELISA:检测血清中病毒gp51和p24的抗体，gp51的抗体出现较早，而且稳定。
6.比较绵羊、山羊、马、猫等动物慢病毒的传播途径及致病特点。
（1）绵羊：维士纳病毒|梅迪病毒，最主要的传播途径是呼吸道，但也可通过奶传给羔羊。精子可携带大量病毒。患病毒血症的羊体液淋巴细胞含毒，吸血昆虫叮咬或手术处理等可造成机械传播。
维士纳病致绵羊脑膜脑炎，食欲正常但日趋消瘦。梅迪病则因间质性肺炎引致呼吸困难及渐进性消瘦。
（2）山羊：山羊关节炎|脑脊髓炎病毒，主要通过乳汁感染，其次是感染羊分泌物（如粪便、唾液、鼻涕、泌尿生殖道的分泌物等）及污染的饲料、饮水，经消化道感染。
症状表现主要是脑脊髓炎和多发性关节炎，部分病例伴有间质性肺炎和间质性乳腺炎。
（3）马：马传染性贫血病毒，吸血昆虫包括厩蝇、蚊可能还有库蠓能机械性传播病毒。污染的诊疗器械也是不可忽视的传播媒介。已证实病毒可通过胎盘、病马的血液及各种分泌物、排泄物(如乳、唾液、尿、精子等)传递病毒。
症状有急性、亚急性、慢性及亚临床性4种类型。急性型症状最为典型，出现发热、严重贫血、黄痘等，80%患马死亡。急性或亚急性耐过的马可终身持续感染。病毒首先感染巨噬细胞，然后是淋巴细胞，所有感染马终身出现细胞结合的病毒血症。
（4）猫：猫免疫缺陷病毒，FIV很少发生在圈养猫群。散养猫尤其是雄性猫，因打斗通过咬伤而感染病毒。尽管精子可带毒，但性行为并非主要传播途径。猫崽可通过初乳及乳液从急性感染期的母猫感染病毒。
病程分为：以淋巴结病及发热为特征的急性阶段，漫长的亚临床阶段，以退行性病变和机会感染为特征的终末阶段。在终末阶段常见口腔、牙周组织、颊部以及舌部发生细菌及霉菌的机会感染，约25%的患猫表现为慢性呼吸道病，约5%为严重的神经性疾病
7.举例说明动物慢病毒的检测手段和预防措施。
以绵羊进行性肺炎病毒为例：
诊断：最通用的方法是用琼脂凝胶免疫扩散试验,检测血清中病毒核芯抗原p28或囊膜抗原gp135的抗体。免疫转印技术比之更敏感,可用于确诊。也可取外周血淋巴细胞用ELISA或RT-PCR原位杂交检测病毒。分离病毒则要将外周血梯度离心,取淋巴细胞加入白细胞介素-2,与经丝裂原处理的健康绵羊外周血淋巴细胞共同培养。
防控：维土纳/梅迪病是OIE规定通报的疫病。冰岛采取严格的宰杀政策消灭了本病。其他国家多采取检测加淘汰的措施,检测抗体的方法可用琼脂凝胶免疫扩散试验或合胞体空斑减数试验(病毒可在绵羊脉络丛细胞生长,形成合胞体)等。
8.试述嗜肝病毒的结构和复制特点。
特性：病毒颗粒直径42~48nm，20面体对称的核衣壳(芯髓)直径27~30nm,外有囊膜。基因组为单分子环状(由黏性末端相连)的DNA,部分双股、部分单股。全长股为负链，大小为3.0~3.3kb,另一互补的较短股为1.7~2.8kb,尚余有15%~50%的分子为单股状态。全长股在独有部位上具有一个缺口，两属不相同。负链的5'端有一个蛋白质分子共价相连，正链5'端有一19个核苷酸的帽。
复制特点：在病毒核衣壳携带的DNA聚合酶的作用下，在肝细胞核内形成全长的环状双股DNA,其负链DNA作为合成全长正链RNA转录物的模板，后者在感染细胞的细胞质中被包装人病毒芯髓之中，此时病毒反转录酶以正链RNA为模板，反转录负链DNA，在此过程中正链RNA降解。接下来病毒DNA聚合酶利用新合成的负链DNA作为模板，合成正链DNA,但在全部完成之前，已形成的不完整的双股DNA即被包装入病毒颗粒。病毒DNA还被整合到宿主细胞的基因组中，导致持续性感染,并以尚未了解的方式产生原发性肝癌。
第三十一章
1.呼肠孤病毒科有哪些重要的属?比较其异同。
ICTV在2012年的病毒分类报告将其分为2个亚科:光滑呼肠孤病毒亚科和刺突呼肠孤病毒亚科,前者有6个属,后者9个属。对动物有致病性的,属于光滑呼肠孤病毒亚科的有4个属:环状病毒属、轮状病毒属、东南亚十二节段病毒属、蟹十二节段病毒属;属于刺突呼肠孤病毒亚科的有6个属:正呼肠孤病毒属、水生呼肠孤病毒属、科州蜱传热病毒属、质型多角体病毒属、昆虫双链九片段RNA病毒属以及昆虫非包裹呼肠孤病毒属,后3个属仅见于昆虫。
2.哺乳动物正呼肠孤病毒与禽正呼肠孤病毒各有何致病特点?
哺乳动物正呼肠孤病毒：MRV有4个血清型，主要是1-3型。在家畜引致呼吸道感染或腹泻，1型于牛，3型于绵羊、猫和犬最常见。MRV感染猴可引致肝炎及脑膜炎。MRV3型致病性对实验动物最突出，引致小鼠的“油毛综合征”，还可引致肝炎、心肌炎、肺炎及脑炎等，死亡率达50%。MRV对小鼠、大鼠还有致畸变作用。美国在患严重肠炎死亡的奶牛发现本病毒。
禽正呼肠孤病毒：病毒的感染在鸡群中普遍存在，由无症状感染到致死性病患，因毒株及宿主年龄而异，可表现为禽病毒性关节炎综合征或“暂时性消化系统紊乱”。VAS亦名禽病毒性关节炎及滑液囊炎，主要发生于5~7周龄肉鸡，表现为不同程度的跛行，跗关节剧烈肿胀，趾及跖部肌腱及腱鞘发炎，发病率可达10%，死亡率-般低于2%。禽正呼肠孤病毒常见于鸡马立克病病毒、传染性囊病病毒等感染的病例，一般认为由于它的混合感染，加剧了病情。
3.蓝舌病毒的病原及致病特点如何?
BTV引致蓝舌病，是绵羊的主要传染病之一，特征为高热，口鼻黏膜高度充血，唇部水肿，继而发生坏疽性鼻炎，口腔黏膜溃疡，蹄部炎症及骨骼肌变形。病羊舌部可能发绀，因此称之为蓝舌病。
自然感染的潜伏期为3~7d，人工感染因毒株毒力及绵羊易感性的差异在2~15d之间。患羔还可腹泻，致死率高者可达95%。牛和山羊易感性较低。野生反乌动物中鹿较易感。
4.蓝舌病毒需与哪些病毒做鉴别诊断?如何进行?
蓝舌病毒必须结合临床症状与病毒分离才能确诊，抗体阳性只表明发生感染。国际通用的方法为补体结合试验、免疫荧光技术或琼脂扩散试验等，用以检测群特异抗体。其中以琼脂扩散试验最为方便实用，在感染后4d即可检出抗体，且可持续1年。琼脂扩散试验可与茨城病毒及鹿流行出血症病毒出现交叉反应，因此有必要应用群特异的单克隆抗体检测。
如何：分离病毒应取急性发热期病畜的全血，离心取红细胞，洗去血液中可能存在的抗体，然后用超声波裂解红细胞使病毒释放，再用它静脉接种11日龄鸡胚，或接种2d以内的新鲜Vero细胞，分离的毒株做中和试验定型。
5.非洲马瘟病毒如何传播及检测?
传播：病毒通过吸血昆虫叮咬感染动物后，首先在局部淋巴结复制，随后产生短暂的病毒血症，继而感染网状内皮系统及其他组织，并产生二次病毒血症。吸血昆虫是传播媒介，主要是库蠓类，其次是伊蚊、蜇蝇、按蚊。未发现接触传染。虽说全年均可流行，但在多雨炎热的季节尤为高发。
检测：可取血清做补体结合试验或中和试验检测抗体。抗原检测的最佳材料是脾，含毒量最高，可用琼脂扩散试验或免疫荧光技术。确定血清型则应做病毒分离，可用Vero或MS细胞，产生CPE及细胞质包涵体，再用型特异血清做中和试验定型。也可用吮乳小鼠脑内接种分离病毒。用病毒多肽VP7免疫动物制取高免血清，建立的竞争ELISA法，敏感而又特异，既可用于检测血清的群特异抗体，也可用于直接检测组织中和抗原。
6.分析轮状病毒的致病性、电泳型及抗原性。
潜伏期16~24h,发生水样腹泻，往往带有黏液。少数由于失水或继发大肠杆菌等感染导致患畜死亡，一般能在3~4d内康复。病毒感染小肠绒毛，使之变短，并被立方上皮细胞覆盖。乳糖酶等分泌减少，影响糖的吸收，奶中未消化的乳糖促进细菌的生长，从而加剧腹泻。
7.轮状病毒是如何发现的?给人以何种启示?
轮状病毒于1969年首先发现于腹泻的犊牛粪便中，此后在人、绵羊、猪、马、犬、猫、兔、鼠、猴及禽均有发现，全世界均有报道。各种动物的轮状病毒所致腹泻的症状、流行病学及诊断方法均类似，一般仅发生于1-8周龄的动物。从动物分离的轮状病毒极少感染人，即使有的与人类的分离株并无区别。
9.草鱼出血病病毒的致病特点如何?怎样预防?
致病特点：4-5月龄的草鱼易感，死亡率可达70%，发病水温在20C以上，广泛流行于我国南方各省，一般多在6-9月份流行，8-9月为高峰。病变以充血、出血为特征，表现为肌肉、鳃瓣、鳍基及肠道充血。鳃可能是传染途径。GCV除感染草鱼外，还能人工感染青鱼及麦穗鱼，从自然发病的青鱼中分离到的病毒与之有很强的交叉反应。成熟的草鱼卵可带毒，污染的水源可传播病毒。
预防：用有机碘等消毒剂处理带毒鱼卵及污染鱼塘行之有效。疫区可用疫苗接种，注射或浸泡均可。用组织匀浆或细胞培养物制成的灭活疫苗，我国已批准应用。
11.阐述传染性囊病病毒的致病机理及主要致病特点。
机理：本病毒感染后在肠道的巨噬细胞及淋巴细胞中复制，进人循环系统，导致初次病毒血症。在感染后11h,在囊淋巴细胞中检测到病毒抗原。此时大量的病毒从囊释放，导致二次病毒血症，并在其他组织中定位。VP5在病毒感染早期可抑制感染的鸡胚成纤维细胞凋亡，而VP2则引致感染细胞凋亡。
特点：本病毒通过直接接触传染或经口感染，可经鸡粪排出，在外环境中极其稳定，在鸡圈内可存活4个月以上，在饲料中可存活7周左右。常用的清洁及消毒措施往往不能有效地消灭本病毒。昆虫亦可作为机械传播的媒介，带毒鸡胚可垂直传播。
13.试述传染性肌坏死病毒的特点及致病性。
特点：病毒颗粒为20面体，直径40mm,，基因组为单片段双链RNA分子，7560bp。含有2个不重叠的开放阅读框。
